Cделать стартовой

Т.В.Глазанова, кандидат медицинских наук, Л.Н.Бубнова, доктор медицинских наук, В.И.Мазуров¹, доктор медицинских наук, Ю.В.Крекова¹
НИИ гематологии и трансфузиологии, 1Медицинская академия последипломного образования
Санкт-Петербург, Россия

Инсулинзависимый сахарный диабет (ИЗСД) занимает существенное место в структуре общей заболеваемости, его распространенность в разных регионах России составляет 2,5–3,8 %, и количество больных удваивается каждые 10–15 лет [1]. Инсулин как природный ростовой фактор регулирует участие Т-лимфоцитов в клеточно-опосредованных реакциях, влияя на иммунокомпетентные клетки через мембранные рецепторы к инсулину, присутствующие на активированных Т- и В-лимфоцитах [2]. Активность инсулиновых рецепторов не одинакова у разных субпопуляций иммунокомпетентных клеток [3]. Имеются данные, что система иммунитета реагирует на инсулин до начала инсулинотерапии [4], однако в последующем клеточный иммунный ответ на инсулин в периферической крови больных ИЗСД снижается [5].

Материалы и методы. Нами было обследовано 26 пациентов с ИЗСД в возрасте 18–57 лет — 12 мужчин и 14 женщин — со средней длительностью заболевания 13,7 ± 7,7 лет. Для изучения влияния типа инсулина на характер и степень изменения иммунологических показателей все больные были разделены на 2 группы: в 1-ю вошли 20 чел., получавшие рекомбинантные человеческие типы инсулина (Протафан НМ, Хумулин НМ или Актрапид НМ), во 2-ю — 6 чел., получавшие свиные типы инсулина (Ленте МС, Монотард МС).

У пациентов оценивали следующие иммунологические показатели: относительное содержание субпопуляций лимфоцитов периферической крови с помощью моноклональных антител; возможность бластной трансформации лимфоцитов — спонтанной и индуцированной митогеном фитогемагглютинином (ФГА), с последующей радиометрической оценкой по включению 3Н-тимидина в делящиеся клетки; способность периферических мононуклеарных клеток к спонтанной и индуцированной липополисахаридом продукции провоспалительных цитокинов ФНО-a и ИЛ-1b .

Результаты. При сравнении полученных результатов иммунологического исследования исходные показатели (в стадии декомпенсации заболевания) в каждой из групп пациентов с ИЗСД были приняты за 100 %. Значение соответствующих иммунологических показателей на момент компенсации углеводного обмена (в % по отношению к исходной) приведено на рис. 1–2.

Согласно данным (рис.1), применение человеческого инсулина сопровождалось небольшим уменьшением содержания Т-(CD3+) и В-клеток (CD22+) — соответственно, на 4,6 и 5,1% от исходного и более значительным снижением (на 15,7 и 41,0 %, соответственно) уровня иммунорегуляторных Т-клеточных субпопуляций (CD4+ и CD8+). В то же время при приеме свиного инсулина повышалось относительное содержание CD4+, CD8+ и особенно — CD22+-клеток, соответственно, на 18,5; 10,6 и 102,0 %.

Кроме того, применение человеческого инсулина сопровождалось снижением относительного содержания активированных лимфоцитов (DR+ и CD25+) и естественных киллеров (CD16+). Их количество в фазе компенсации уменьшилось на 20,0, 21,9 и 27,2%, соответственно; содержание клеток с фенотипом CD7+ не изменилось. На фоне применения свиного инсулина, напротив, данные показатели возрастали. Так, во 2-й группе больных содержание DR+-клеток превысило исходный уровень на 22,1 %, CD16+ — на 26,4 %, CD25+ — на 46,0 % и CD7+ — на 15,2 %.

Применение человеческого инсулина практически не влияло на количество пре-апоптотических (CD95+) лимфоцитов, а уровень CD18+-, CD28+- и CD152+-клеток при этом незначительно снижался. Использование в лечении больных ИЗСД свиного инсулина сопровождалось значительным возрастанием в фазе компенсации уровня CD95+- лимфоцитов — на 46,2%, CD18+-лимфоцитов — на 59,7%, CD152+ — на 49,0%, а CD28+-клеток — почти в 2 раза.

Характер изменения функциональных иммунологических показателей на фоне применения различных типов инсулина был несколько иным, чем динамика показателей клеточного иммунитета (рис. 2). Так, оба типа инсулина в фазе компенсации сахарного диабета снижали спонтанную пролиферативную активность лимфоцитов. Однако на фоне применения человеческого инсулина отмечалось уменьшение ФГА-индуцированной пролиферации (на 66,9 % от исходного уровня), а свиного — повышение (на 46,5 %).

Также было выявлено снижение спонтанной (на 28,0 %) и индуцированной (на 69,7%) ФНО-a-продуцирующей активности лимфоидных клеток у пациентов, получавших свиной инсулин, тогда как терапия человеческим инсулином сопровождалась возрастанием индуцированной продукции данного цитокина (на 53,3%). Способность периферических клеток к выработке ИЛ-1b уменьшалась при применении инсулина обоих типов, однако более выраженно на фоне лечения свиным инсулином: спонтанной продукции ИЛ-1b — на 53,4 %, а индуцированной — на 93,6 %. У пациентов, получавших человеческий инсулин, данные показатели снизились на 46,7 и 4,5 %, соответственно.

Обсуждение. Таким образом, применение человеческого инсулина сопровождается умеренным снижением содержания большинства субпопуляций лимфоцитов и их ФГА-индуцированной пролиферативной активности. При терапии свиным инсулином величины этих показателей отчетливо возрастают. Установлено, что при использовании человеческого инсулина способность к продукции ФНО-a повышается и, наоборот, снижается на фоне терапии свиным типом инсулина. Способность к продукции ИЛ-1b уменьшается независимо от типа применяемого инсулина. Вероятно, возрастание относительного содержания субпопуляций лимфоцитов периферической крови и их пролиферативной активности при применении свиного инсулина обусловлено его ксеногенным происхождением. По нашему мнению, данный препарат может быть достаточно сильным неспецифическим стимулятором иммунологических реакций. Результаты исследования подтверждают тот факт, что рекомбинантный человеческий инсулин обладает меньшими, чем свиной инсулин, антигенными свойствами и, следовательно, не вызывает значимой реакции иммунокомпетентных клеток.

Литература

1. Балаболкин М.И. Диабетология. М.: Медицина, 2000.
2. Insulin regulates T-cell participation in immune reactions / J.Helderman, K.Auso, K.Rosenstock, P.Raskin // J.Clin. Invest. 1987. № 2, Vol.79. P.566–571.
3. Инсулинсвязывающая активность иммунокомпетентных клеток у детей с сахарным диабетом / Г.Д.Жумагалиева, Э.Г.Скрябина, В.В.Смирнов и др. // Иммунология. 1997. № 3. С.9–11.
4. Асфандиярова Н.С., Колчева Н.Г., Шатрова И.В. О гетерогенности сахарного диабета // Тер. архив. 1999. № 12. С.49–52.
5. Durinovic-Bello I. Autoimmune diabetes: the role of T cells, MHC molecules and autoantigens // Autoimmunity. 1998. № 3, Vol.27. P.159-177.